Morphological and molecular characterization of Austrodiplostomum compactum metacercariae in the eyes and brains of fishes from the Ivaí River, Brazil / Caracterização morfológica e molecular de metacercárias de Austrodiplostomum compactum em olhos e cérebros de peixes do Rio Ivaí, Brasil

Abstract Austrodiplostomum spp. (Platyhelminthes: Digenea) are endoparasites with a broad geographic distribution in South America. During the larval stage, they parasitize the eyes, brains, muscles, gill, kidneys and swim bladder of a wide variety of fishes. The metacercariae of Austrodiplostomum spp. have several morphological characteristics during development, but are very similar among species, which makes it necessary to use molecular tools to contribute to the elucidation during the larval stage. The objective of this study was to perform morphological and molecular analyses of Austrodiplostomum sp. found in specimens of Hypostomus sourced from the Ivaí River in the state of Paraná, Brazil. Of the 93 analyzed specimens (H. hermanni [n = 50], H. albopunctatus [n = 9], Hypostomus sp. 1 [n = 24], and Hypostomus sp. 2 [n = 10]), 60 were parasitized. A total of 577 Austrodiplostomum sp. metacercariae was collected from the infected hosts; DNA from seven of these samples was extracted, amplified, and sequenced. The morphological data associated with the genetic distance values and the relationships observed in the COI gene tree, indicate that all metacercariae were A. compactum. This is the first record of A. compactum parasitizing H. hermanni, H. albopunctatus, Hypostomus sp. 1, and Hypostomus sp. 2 in the Ivaí River.

Resumo Austrodiplostomum spp. (Platyhelminthes: Digenea) são endoparasitos com uma ampla distribuição geográfica na América do Sul. Durante a fase larval, parasitam os olhos, cérebros, músculos, brânquias, rins e bexiga natatória de uma grande variedade de peixes. As metacercárias de Austrodiplostomum spp. apresentam várias características morfológicas durante o desenvolvimento, as quais são muito semelhantes entre as espécies, o que torna necessário o uso de ferramentas moleculares para contribuir para a elucidação durante a fase larval. O objetivo deste estudo foi realizar análises morfológicas e moleculares de Austrodiplostomum sp. encontradas em espécimes de Hypostomus provenientes do rio Ivaí, no Paraná, Brasil. Dos 93 espécimes analisados (H. hermanni [n = 50], H. albopunctatus [n = 9], Hypostomus sp. 1 [n = 24], e Hypostomus sp. 2 [n = 10]), 60 foram parasitados. Um total de 577 metacercárias de Austrodiplostomum foram coletadas dos hospedeiros infectados; o DNA de sete dessas amostras foi extraído, amplificado e sequenciado. Os dados morfológicos, associados aos valores de distância genética e as relações observadas na árvore gênica do COI, indicam que todas as metacercárias são A. compactum. Este é o primeiro registo de A. compactum parasitando H. hermanni, H. albopunctatus, Hypostomus sp. 1, e Hypostomus sp. 2 no rio Ivaí.

Platynosomum illiciens (Trematoda: Dicrocoeliidae) in a hybrid marmoset (Callithrix sp.) in the Municipality of Seropédica, RJ, Brazil - Case report / Platynosomum illiciens (Trematoda: Dicrocoeliidae) em um sagui híbrido (Callithrix sp.) no município de Seropédica, RJ, Brasil - Relato de caso

Abstract Platynosomum illiciens is a liver trematode encountered infecting mainly felids although it has also been reported in birds and in additional mammalian species, including non-human primates. The current study reports a natural P. illiciens infection primate of the genus Callithrix. The diagnosis was made using a combination of copro-parasitological techniques, morphological evaluation of adult specimens recovered from the liver during necropsy, and molecular analyses. Eggs were brown in color, oval, operculated, and contained a miracidium. Adult specimens recovered during necropsy were measured and showed dimensions compatible with P. illiciens. Molecular characterization of the trematode involved amplification by polymerase chain reaction (PCR), in combination with nucleotide sequencing, of an approximately 900 base pairs fragment corresponding to 18S-ITS1-5.8S ribosomal DNA. Sequenced amplicons showed 100% nucleotide identity with sequences deposited in the GenBank database as derived from specimens of P. illiciens recovered from cats in Malaysia and Brazil. It was concluded that the morphological and molecular analyses presented herein, confirmed the identification of the trematode recovered as P. illiciens.

Resumo Platynosomum illiciens é um trematódeo do fígado, encontrado principalmente em felinos, embora também tenha sido relatado em aves e outras espécies de mamíferos, incluindo primatas não humanos. Este estudo relata um caso de parasitismo natural por P. illiciens em um primata do gênero Callithrix. O diagnóstico foi feito com uma combinação de técnicas coproparasitológicas, avaliação morfológica de espécimes adultos recuperados do fígado durante a necropsia e análise molecular. Os ovos eram de cor marrom, ovais, operculados e continham um miracídio. Espécimes adultos recuperados durante a necropsia foram medidos e mostraram dimensões compatíveis com P. illiciens. A caracterização molecular do trematódeo envolveu a reação em cadeia da polimerase (PCR) e o sequenciamento de um fragmento de, aproximadamente, 900 pares de bases correspondentes ao DNA robosomal 18S-ITS1-5.8S, que apresentou 100% de identidade da sequência de nucleotídeos com as sequências do GenBank depositadas como derivadas de P. illiciens recuperados de gatos na Malásia e no Brasil, respectivamente. Concluiu-se pelas análises morfológicas e moleculares aqui apresentadas, que o trematódeo é da espécie P. illiciens.

Phyllodistomum vaili(Plagiorchiida: Gorgoderidae) infecting Parupeneus rubescens (Perciformes: Mullidae): morphology and phylogeny / Phyllodistomum vaili (Plagiorchiida: Gorgoderidae) infectando Parupeneus rubescens (Perciformes: Mullidae): morfologia e filogenia

Abstract Knowledge of the Arabian Gulf fish's parasite fauna is very poor. Until recently, only scattered reports from different locations are known for ecto- and endoparasites. Therefore, the present study aimed to investigate the digenean species that infects one of the most economically fish species in the Arabian Gulf, the rosy goatfish Parupeneus rubescens . One plagiorchiid species has been described, belonging to the Gorgoderidae family, and has been named as Phyllodistomum vaili Ho, Bray, Cutmore, Ward & Cribb, 2014 based on its morphological and morphometric characteristics. In order to accurately classify and characterize this plagiorchiid species, molecular analysis was carried out using both nuclear 18S and 28S rRNA gene regions and revealed that the present plagiorchiid species was associated with other species belonging to the Gorgoderidae family and deeply embedded in the Phyllodistomum genus, closely related to the previously described P. vaili (gb- KF013187.1, KF013173.1). The present study therefore revealed that the species Phyllodistomum is the first account as endoparasites from the rosy goatfish inhabiting the Arabian Gulf.

Resumo O conhecimento da fauna de parasitas dos peixes do Golfo Árabe é escasso. Atualmente, apenas relatórios dispersos de diferentes locais são conhecidos para ecto e endoparasitas. Portanto, o presente estudo teve como objetivo investigar as especies digenéticas que infectam uma das espécies economicamente mais importantes do Golfo Arábico, o peixe-cabra rosado Parupeneus rubescens . Uma espécie de plagiorquídeo foi descrita, pertencente à família Gorgoderidae e foi denominada Phyllodistomum vaili Ho, Bray, Cutmore, Ward & Cribb, 2014, com base em suas propriedades morfológicas e morfométricas. A fim de classificar e caracterizar com precisão essa espécie de plagiorquídeo, a análise molecular foi realizada usando as regiões nucleares do gene 18S e 28S rRNA, revelando que a atual espécie de plagiorchídeo estava associada a outras espécies pertencentes à família Gorgoderidae e, profundamente incorporada ao gênero Phyllodistomum , intimamente relacionado ao P. vaili descrito anteriormente (gb - KF013187.1, KF013173.1). O presente estudo revelou, portanto, que a espécie Phyllodistomum vailli é o primeiro relato como endoparasita do peixe-cabra rosado que habita o Golfo Arábico.

Molecular identification and histological aspects of Renicola sloanei (Digenea: Renicolidae) in Puffinus puffinus (Procellariiformes): a first record / Identificação molecular e aspectos histológicos de Renicola sloanei (Digenea: Renicolidae) em Puffinus puffinus (Procellariiformes): primeiros registros

Abstract Renicolids are parasites that inhabit the renal tubules and ureters of molluscivorous and piscivorous birds. Puffinus puffinus is a migratory seabird that was identified as the definitive host of Renicola spp. Studies focusing on the renicolid species and the resulting renal lesions are valuable for their association with causes of stranding in seabirds. The aim of this study was to identify the renicolid trematodes and evaluate the histological findings in two P. puffinus stranded on the coast of Paraná state, Brazil. The parasites were evaluated by histologic, ultrastructural and molecular assays, while tissue changes were analyzed by histologic methods. The morphological and morphometrical characteristics of the parasites, along with polymerase chain reaction and sequencing assays (ribosomal and mitochondrial regions), identified the species as Renicola sloanei. The results also suggest that this helminth can be the adult form of Cercaria pythionike. The dilation of collecting ducts was the main histological finding in the kidneys. In conclusion, R. sloanei was identified, and for the first time, P. puffinus was described as a host of this digenean inducing mild renal changes.

Resumo Renicolídeos são parasitos que habitam túbulos renais e ureteres de aves que se alimentam de moluscos e peixes. Puffinus puffinus, ave marinha migratória, foi registrada como hospedeiro definitivo de Renicola spp. Estudos relacionados com as espécies de renicolídeos e as lesões renais resultantes são importantes para o entendimento das causas de óbito de aves marinhas. O objetivo deste estudo foi identificar os trematódeos renicolídeos e avaliar os achados histológicos em dois P. puffinus encalhados no litoral do Estado do Paraná, Brasil. Os parasitos foram avaliados por ensaios histológicos, ultraestruturais e moleculares, enquanto as alterações teciduais foram analisadas por métodos histológicos. As características morfológicas e morfométricas dos parasitos, juntamente com a reação em cadeia da polimerase e sequenciamento (regiões ribossomal e mitocondrial), identificaram a espécie como Renicola sloanei. Os resultados também sugerem que este helminto pode ser a forma adulta de Cercaria pythionike. A dilatação dos ductos coletores foi o principal achado histológico renal. Em conclusão, R. sloanei foi identificado, e pela primeira vez P. puffinus foi descrito como hospedeiro deste digenético induzindo alterações renais discretas.